畜牧兽医学报 ›› 2018, Vol. 49 ›› Issue (7): 1460-1466.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.07.015
梁文花, 贾云慧, 许程志, 吴运谱, 陈艳, 杨焕良, 乔传玲*, 陈化兰
收稿日期:
2018-01-03
出版日期:
2018-07-23
发布日期:
2018-07-23
通讯作者:
乔传玲,研究员,主要从事动物流感防控技术的研究,E-mail:qcl@hvri.ac.cn
作者简介:
梁文花(1991-),女,山东临沂人,硕士生,主要从事猪流感单克隆抗体研究,E-mail:13011229577@163.com
基金资助:
国家重点研发计划项目(2017YFD0501603)
LIANG Wen-hua, JIA Yun-hui, XU Cheng-zhi, WU Yun-pu, CHEN Yan, YANG Huan-liang, QIAO Chuan-ling*, CHEN Hua-lan
Received:
2018-01-03
Online:
2018-07-23
Published:
2018-07-23
摘要:
为了制备抗欧亚类禽型(Eurasian avian-like,EA) H1N1猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)蛋白的单克隆抗体(MAb)并对其生物学活性进行检测,利用SIV A/swine/Henan/11/2005(HN11)增殖、纯化的全病毒蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,采用间接ELISA和HI检测方法进行筛选。结果获得了两株能稳定分泌抗HA蛋白MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为2B6和4C7;两株MAbs的腹水ELISA和HI效价均分别高于1:107和5 log2;两株MAbs能够在IFA试验中与病毒HA蛋白发生反应,而在Western blot试验中不能检测到病毒HA蛋白;病毒中和试验结果显示这两株MAbs对EA H1N1 SIV具有病毒中和活性;MAbs的抗病毒活性又进一步通过小鼠的感染试验进行了评估,结果表明接种了MAbs的小鼠获得了有效抵抗同源及异源H1N1 SIV感染的保护效果。研究证实制备的两株MAbs具有较高的病毒中和活性和较强的抗病毒感染能力,可以将其进一步应用于抗EA H1N1 SIV的感染及开展病毒抗原性变异的分子基础研究。
中图分类号:
梁文花, 贾云慧, 许程志, 吴运谱, 陈艳, 杨焕良, 乔传玲, 陈化兰. 两株H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白中和性单克隆抗体的制备及抗病毒活性研究[J]. 畜牧兽医学报, 2018, 49(7): 1460-1466.
LIANG Wen-hua, JIA Yun-hui, XU Cheng-zhi, WU Yun-pu, CHEN Yan, YANG Huan-liang, QIAO Chuan-ling, CHEN Hua-lan. Preparation and Antiviral Activity of Two Neutralizing Monoclonal Antibodies against HA Protein of H1N1 Swine Influenza Virus[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2018, 49(7): 1460-1466.
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